简 介:Western Blotting,又称蛋白免疫印迹技术,该技术是检测组织细胞中目的蛋白表达与否,以及目的蛋白表达水平差异的重要手段。
技术优势:
(1) 高质量蛋白提取:高质量蛋白提取是Western成功的关键,本公司采用特定的裂解液以及抑制剂能够有效提取完整蛋白,尤其对较少样品的提取具有丰富的经验。
(2) 高分子量(>120 kDa)以及低分子量(<10 kDa)转膜优化:采用优化的转膜条件以及特有的转膜缓冲液实现高分子量以及低分子量的有效转膜。
(3) 有效降低的杂交背景及非特异性杂交:本公司采用特定的Blocking Buffer以及完善的抗体优化条件有效降低非特异性杂交反应和降低背景。
(4) 极高灵敏度:本公司采用高灵敏度ECL试剂以及增强剂,对fg级别蛋白也具有较好的检测效果。
(5) 较为完善的抗体库:本公司拥有较多的进口抗体(Abcam;CST;Millipore; Sigma等公司),特别是信号途径的关键抗体以及磷酸化抗体,大大减少了客户抗体购买费用及节省时间。
(6)专业的光密度分析:本公司拥有非常准确的光密度分析软件及经验,对光密度的采集及分析极为准确。
客户须知:
Western Blotting分析 |
周期 |
最终提供客户资料 |
Western Blotting |
10-14个工作日 |
原始WB检测胶片(含显影Marker,便于文章投稿使用) 高分辨率胶片扫描结果(客户直接可以放在高水平文章上) 详细实验报告(操作流程及抗体信息) 光密度扫描分析(三次光密度扫描结果,便于客户制备柱状图) |
案例:
客户提供:
样品类型 |
组织样本 |
细胞样品 |
样品需要量 |
≥100 mg
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≥1-10×106个(相当于六孔板长满后的一个孔细胞量) |
取样和保存环境 |
新鲜组织:100 mg以上,液氮速冻; 冻存组织:-80 ℃保存, 100 mg以上。 |
贴壁细胞:弃培养基,胰酶消化,离心(1000g,5 min),弃去上清; 加入PBS重悬;然后离心(同上),弃上清;只保留细胞沉淀,冻存于-80 ℃或干冰直接运输。
悬浮细胞:离心(1000g,5 min),弃去上清;加入PBS重悬;然后离心同上,弃上清;只保留细胞沉淀,冻存于-80 ℃或干冰直接运输。
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运输 |
杭州市内干冰上门取样; 外地客户干冰快递运输。 |
杭州市内干冰上门取样; 外地客户干冰快递运输。
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*(经本公司评估后,实验没有结果,不收取任何费用)