BSP(Bisulfite Genomic Sequence)技术是提取的基因组DNA,经过NaHSO3处理后,未甲基化CpG中“C”会转换成“T”;而甲基化CpG中的“C”依然保持“C”,通过设计BSP引物,进行PCR扩增,测序,从而确定CpG中甲基化数目及位置。目前主要用于启动子中CpG甲基化程度高低与基因表达之间的关系研究。
基本流程:
技术优势:
(1) 本公司在未知基因启动子克隆方面,具有丰富的经验。目前已完成了团头鲂、蜥蜴、菊花、香草、中国对虾、三疣梭子蟹等众多的物种基因启动子调取工作,为分析CpG岛以及CpG甲基化与表达调控研究打下基础。
(2) 目前,国内外试剂盒C-T转换试剂盒的效率与实际宣传有一定差距,本公司对试剂盒进行了系统改进,使得C-T转换效率达到99%以上。
(3) BSP-PCR中最难的是引物的设计及优化,本公司经过多年的积累,在引物的设计方面具有极为丰富的经验。
客户须知:
CpG甲基化BSP-PCR技术服务 |
周期 |
最终提供客户资料 |
CpG甲基化BSP-PCR技术服务 |
14-21个工作日,视样品和基因数目而定。 |
详细实验总结报告(包括基因组DNA提取、C-T转换、PCR扩增、电泳、测序、BiQAnalyzer分析结果等)。
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案例:
本实验,首先通过启动子克隆技术分别获取甘肃鼢鼠和高原鼢鼠某基因上游的启动子,通过http://www.urogene.org/cgi-bin/methprimer/methprimer.cgi在线寻找该启动子的CpG区域,然后通过对BSP-PCR技术对不同海拔该基因启动子甲基化程度进行分析,从中找到肤色变化与该基因启动子甲基化程度的关系,部分实验结果如下:
客户提供:
样品类型 |
组织样本 |
细胞样品 |
基因组DNA |
样品需要量 |
≥100 -200 mg |
≥5-10×106个 |
≥2.0 ug |
取样和保存环境 |
新鲜;-80℃冻存或存于组织保存液中 |
新鲜;-80℃冻存或存于组织保存液中
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运输 |
杭州市内干冰上门取样; 外地客户干冰快递运输。 |
杭州市内干冰上门取样; 外地客户干冰快递运输。
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杭州市内干冰上门取样; 外地客户干冰快递运输。
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*(经本公司评估后,实验没有结果,不收取任何费用)